Efecto del estradiol en la respuesta inflamatoria de los fibroblastos pulpares de rata in vitro
Fil: Soto, Sabrina Noelia. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología; Argentina.
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Format: | doctoralThesis |
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Published: |
2024
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Online Access: | http://hdl.handle.net/11086/551307 |
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author | Soto, Sabrina Noelia |
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spelling | rdu-unc.5513072024-04-04T06:34:58Z Efecto del estradiol en la respuesta inflamatoria de los fibroblastos pulpares de rata in vitro Soto, Sabrina Noelia Cambiasso, María Julia Fil: Soto, Sabrina Noelia. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología; Argentina. Fil: Soto, Sabrina Noelia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra; Argentina. La pulpa dental es el único tejido blando del diente, sus características anatomo-estructurales determinan que la pulpa genere mecanismos especiales de respuesta inflamatoria frente al ataque de una noxa. En la presente tesis, nos propusimos analizar la participación del 17β-estradiol (E2) en el proceso de inflamación pulpar inducido por el lipopolisacarido (LPS). Para ello, se realizaron cultivos primarios enriquecidos en fibroblastos pulpares de ratas hembra adultas de 2 meses de edad y se estableció el curso temporal de la respuesta inflamatoria que nos permitió identificar, estudiar y analizar la expresión de las diferentes citoquinas y receptores de interés dentro de las primeras 24h de la estimulación con LPS. Los genes de las citoquinas proinflamatorias Il6 y Tnfɑ se expresaron de forma significativa en fibroblastos estimulados con LPS yTnfɑ disminuyó su expresión en cultivos tratados con E2 y LPS+E2, mientras que, bajo las mismas condiciones, ll6 no modificó su expresión. El mensajero del factor de crecimiento endotelial vascular, Vegf, se expresó sin cambios debido al tratamiento. No encontramos expresión de las citoquinas proinflamatoria Il1β y antiinflamatoria Il10. En relación con los receptores de estrógeno (RE), detectamos la expresión génica del RE clásico intracelular tipo β (Esr2 ) y del RE asociado a proteína G en membrana plasmática (Gper1) en cultivos tratados con LPS. No encontramos expresión del ARN mensajero de Esr1. E2 no modificó la expresión de ninguno de los REs encontrados en nuestros cultivos. Por otra parte, el receptor TLR4, que juega un papel fundamental en el reconocimiento del LPS y la activación de la inmunidad innata, demostró cambios significativos en su expresión génica tras la estimulación con LPS y con E2. Además, y pudimos comprobar que tanto E2 como LPS+E2 disminuyen significativamente la expresión del receptor (proteína). En lo que respecta a la activación de MAPK, la fosforilación de ERK (aunque no fue significativa) demostró un patrón de activación similar en los tratamientos estimulados con E2 y LPS+E2 diferente a los estimulados solamente con LPS. En conjunto, estos resultados sugieren que E2 podría participar como un inmunomodulador atenuando la respuesta inflamatoria desencadenada por LPS en fibroblastos de pulpa dental de rata in vitro. The dental pulp is the only soft tissue of the tooth; its anatomo-structural characteristics determine that the pulp generates special inflammatory response mechanisms against a noxa attack. In this thesis, we set out to analyze the participation of E2 in the process of pulpal inflammation induced by LPS. For this, primary cultures enriched in pulp fibroblasts from adult female rats two 2-month-old were performed and the time course of the inflammatory response was established, which allowed us to identify, study and analyze the expression of the different cytokines and receptors of interest within the first 24h of stimulation with LPS. The genes of the proinflammatory cytokines Il6 and Tnfɑ were significantly expressed in fibroblasts stimulated with LPS and Tnfɑ decreased its expression in cultures treated with E2 and LPS+E2, while, under the same conditions, ll6 did not modify its expression. The vascular endothelial growth factor messenger, Vegf, was expressed unchanged due to treatment. We found no expression of the proinflammatory Il1β and anti-inflammatory Il10 cytokines. In relation to estrogen receptors (ER), we detected gene expression of the classical intracellular β-type ER (Esr2) and of the ER associated with G protein in the plasma membrane (Gper1) in cultures treated with LPS. We found no expression of the Esr1 messenger RNA. E2 did not modify the expression of any of the REs found in our cultures. On the other hand, the TLR4 receptor, which plays a fundamental role in the recognition of LPS and the activation of innate immunity, showed significant changes in its gene expression after stimulation with LPS and E2. In addition, we were able to verify that both E2 and LPS+E2 significantly decrease the expression of the receptor (protein). Regarding MAPK activation, ERK phosphorylation (although it was not significant) showed a similar activation pattern in the treatments stimulated with E2 and LPS+E2 and different from those stimulated only with LPS. Taken together, these results suggest that E2 could participate as an immunomodulator by attenuating the inflammatory response triggered by LPS in rat dental pulp fibroblasts in vitro. 2027-03-15 Fil: Soto, Sabrina Noelia. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología; Argentina. Fil: Soto, Sabrina Noelia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra; Argentina. 2024-04-03T15:25:34Z 2024 doctoralThesis http://hdl.handle.net/11086/551307 spa Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/ |
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