Desarrollo de un corazón bioartificial a partir de recelularización con células madre de origen adiposo
Tesis (DCI)--FCEFN-UNC, 2022
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Format: | doctoralThesis |
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2024
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author | Nieva, Eduardo Gabriel |
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description | Tesis (DCI)--FCEFN-UNC, 2022 |
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spelling | rdu-unc.5505382024-02-21T06:20:25Z Desarrollo de un corazón bioartificial a partir de recelularización con células madre de origen adiposo Nieva, Eduardo Gabriel Salvatierra, Nancy Alicia Corazón bioartificial células madre matrices descelularizada Tesis (DCI)--FCEFN-UNC, 2022 Fil: Nieva, Eduardo Gabriel. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales; Argentina. El corazón es un órgano único que a partir del día 22 de vida intrauterina comienza a latir y no se detiene hasta la muerte. Sin embargo, durante la vida de una persona puede manifestar alguna falla parcial o total. Para este caso, actualmente, solo existe como solución el trasplante cardíaco. Aún con la reglamentación de la Ley Justina, el número de pacientes en espera de un trasplante cardíaco es elevado. La ingeniería de tejidos brinda un nuevo enfoque y una potencial salida para estas personas en espera de un órgano. En esta Tesis Doctoral se propuso desarrollar una matriz cardíaca descelularizada de conejo, con una estructura tridimensional conservada, como un andamio biológico para la recelularización. Se extrajo el corazón y se descelularizó usando una combinación de agentes descelularizantes, se desinfectó y se evaluaron las matrices obtenidas desde el punto de vista histológico, bioquímico, mecánico y de citobiocompatibilidad. El resultado de las caracterizaciones determinó que se obtuvo un órgano completo descelularizado y una matriz acelular desinfectada con una ultraestructura 3D preservada. Se describió, además, que usando como agente desinfectante el ácido peracético, las propiedades mecánicas de las matrices tratadas fueron mejoradas comparada con el etanol, que es de uso más difundido, sin alterar sus propiedades biocompatibles. Por otro lado, se aislaron con éxito células madre mesenquimales a partir de lipoaspirados y se logró diferenciarlas en células de tipo cardíaco por estimulación química con 5-azaticidina como suplemento. Los resultados mostraron un aumento en la concentración de Troponina T cardiaca en las células estimuladas a los tiempos estudiados, indicando que el uso de estas células mesenquimales indiferenciadas obtenidas a partir de tejido adiposo adulto puede constituir una excelente opción para la recelularización de bioandamios Con la posibilidad de lograr una estimulación mecánica de las matrices bajo condiciones que simulen la fisiología propia del tejido cardiaco, se diseñó, desarrolló eimplementó un biorreactor de bajo costo, para controlar milimétricamente el estiramiento cíclico de los andamios recelularizados. El equipo diseñado mostró un correcto desempeño electrónico bajo condiciones de temperatura y humedad de cultivo celular favoreciendo el acoplamiento electromecánico de las células a la matriz alojada en los pocillos de estimulación. Los resultados de la microscopía confocal, mostraron una adecuada adherencia y supervivencia celular a las matrices según nuestro protocolo de estiramiento propuesto para la estimulación mecánica de las matrices recelularizadas con células previamente diferenciadas en condiciones fisiológicas. Fil: Nieva, Eduardo Gabriel. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales; Argentina. 2024-02-20T12:07:25Z 2024-02-20T12:07:25Z 2023-12-01 doctoralThesis http://hdl.handle.net/11086/550538 spa Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/ |
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