Vesículas extracelulares de Giardia lamblia : análisis proteómico y mecanismos Involucrados en la formación y liberación de exosomas
Tesis (Doctora en Ciencias Químicas) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2020
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2020
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| description | Tesis (Doctora en Ciencias Químicas) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas,
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Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina. Alvarez, Cecilia Inés. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina. Contin, María Ana. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba; Argentina. Cumino, Andrea Carina. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Departamento de Biología; Argentina. Giardia lamblia es un parásito protozoario que coloniza el epitelio intestinal de humanos y otros vertebrados. Las infecciones varían de agudas a crónicas, dependiendo de la susceptibilidad del hospedador y la cepa del parásito. En este trabajo de tesis, mostramos que los subtipos genéticos (ensamblajes) A y B de Giardia lamblia que infectan humanos poseen la capacidad de formar y liberar al medio extracelular vesículas de diferentes tamaños. Además, hemos realizado el primer análisis proteómico de las vesículas extracelulares de ambos ensamblajes y encontramos que, tanto las vesículas de tipo microvesículas como las de tipo exosomas, podrían estar seleccionando el contenido de proteínas conservadas y específicas de G. lamblia. Por otra parte, realizamos una combinación de metodologías que nos permitieron demostrar que G. lamblia secreta al medio extracelular vesículas que son notablemente similares a exosomas de otros tipos celulares en términos de tamaño, forma, densidad y presencia de proteínas típicas. Los resultados obtenidos también mostraron que, a pesar de la falta de cuerpos multivesiculares típicos presentes en el parásito, se pueden formar vesículas de tipo exosomas (tExo) en las vacuolas periféricas (PVs) endo-lisosomales de G. lamblia. Además, análisis ultraestructurales y determinación de la cantidad de tExo liberados mostraron que la actividad ATPasa de la proteína ESCRT Vps4a de G. lamblia y la presencia de la pequeña GTPasa Rab11, son esenciales para la formación de vesículas intraluminares en la PVs y, en consecuencia, para la obtención de tExo en el medio extracelular. También, observamos que la alteración en la función de GlVps4a genera una acumulación inusual de material electrodenso en las PVs, lo que indica que GlVps4p podría estar implicada en el mantenimiento del contenido de estas vacuolas. Los resultados observados, en su conjunto, sugieren que este parásito es capaz de producir diferentes tipos de vesículas extracelulares mediante mecanismos conservados, aunque con características únicas. 2023-06-30 Moyano, Sofía. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina. Touz, María Carolina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra; Argentina. Maletto, Belkys Angelica. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina. Alvarez, Cecilia Inés. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina. Contin, María Ana. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba; Argentina. Cumino, Andrea Carina. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Departamento de Biología; Argentina. 2020-05-19T22:04:54Z 2020-05-01 doctoralThesis http://hdl.handle.net/11086/15191 spa Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 Internacional http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/ |
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