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| 082 |
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|a 616.994
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| 100 |
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|a Guantay, María Laura
|c Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas.
|9 13436
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| 245 |
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|a Cribado fenotípico para el desarrollo y reposicionamiento de fármacos contra células tumorales deficientes en BRCA1 y BRCA2 /
|c María Laura Guantay. - -
|h [recurso electrónico]
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| 260 |
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|a Córdoba :
|b [s. n.],
|c 2023
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| 300 |
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|a 1 Archivo PDF :
|b [recurso electrónico],
|c 6,2 MB
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| 500 |
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|a Departamento de Bioquímica Clínica CIBICI-CONICET Facultad de Ciencias Químicas Universidad Nacional de Córdoba Córdoba, 18 de diciembre de 2023
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| 502 |
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|a Tesis (Doctora en Ciencias Químicas) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2023.
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| 520 |
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|a BRCA2 es un gen supresor de tumores muy caracterizado, cuya deficiencia contribuye al desarrollo de varios tipos de cáncer en seres humanos. A pesar del éxito clínico de los inhibidores de PARP (poli ADP-ribosa polimerasa) en el tratamiento de cánceres deficientes en BRCA, la aparición de mecanismos de resistencia expone la necesidad de buscar nuevos blancos para la inducción de letalidad sintética (LS) en futuros proyectos de desarrollo de fármacos. En esta tesis, nos enfocamos en BRCA2 con el objetivo de identificar interacciones de LS utilizando una colección de compuestos derivados de plantas. Haciendo uso de una plataforma de cribado de alto rendimiento previamente desarrollada en nuestro laboratorio, se analizó una colección de 66 compuestos puros provenientes de plantas nativas y naturalizadas de América del Sur. A partir de este cribado se identificó a Solanocapsina, un alcaloide esteroideo, como un inductor selectivo de LS. Además, en colaboración con el Instituto Multidisciplinario de Biología Vegetal (IMBIV-CONICET) se derivaron múltiples análogos químicos de Solanocapsina que fueron caracterizados en su capacidad de inducir LS. Mediante experimentos de dosis respuesta comparando células deficientes y proficientes en BRCA2, se encontró que el análogo NorAdS mejoró notablemente la potencia de Solanocapsina. Utilizando dos métodos quimioproteómicos complementarios, se identificó a deoxicitidina quinasa (dCK), una enzima limitante de la vía de reciclaje de nucleótidos, como el blanco de Solanocapsina y NorAdS. Validamos este hallazgo utilizando un inhibidor altamente específico de dCK (DI-87), el cual también indujo LS en distintos contextos deficientes de BRCA2. Es importante destacar que la LS inducida por dCK difiere mecanísticamente de la inducida por los inhibidores de PARP. La inhibición de dCK indujo niveles considerablemente más bajos de daño al ADN y los fenotipos citotóxicos se asociaron exclusivamente con la mitosis, lo que sugiere que la precisión en el suministro de nucleótidos durante la mitosis es crucial para la supervivencia de las células deficientes en BRCA2. Además, se desarrolló un modelo de xenoinjerto en ratones, en los cuales se implantaron tumores deficientes en dCK y tumores dobles deficientes para dCK y BRCA2, en flancos opuestos del mismo ratón. Como resultado, se demostró que la inhibición de dCK, en contextos deficientes en BRCA2, es suficiente para desencadenar LS in vivo. Un objetivo complementario de esta tesis fue desarrollar una nueva metodología de cribado basada en microscopía de fluorescencia de alto rendimiento (HCI, del inglés: High Content Imaging) que permita identificar interacciones letales sintéticas en contextos deficientes en BRCA1. Esta plataforma fue generada con células que expresan proteínas fluorescentes fusionadas a histonas que, además de permitir la identificación de células BRCA-proficientes y deficientes, permite obtener información adicional de textura nuclear. Adicionalmente esta plataforma incluye una marcación para la histona γH2AX que permite monitorear inducción de daño en el ADN y estrés replicativo. A partir de un cribado piloto utilizando inhibidores de la respuesta al daño al ADN (DDR), se observó que las drogas Mitoxantrona y Doxorrubicina indujeron LS en contextos deficientes para BRCA1. Esta información nos permitió validar nuestra plataforma ya que esta interacción había sido previamente reportada. Por otro lado, se identificó a Topotecan, Etopósido y Tenipósido, como drogas inductoras de LS en contextos BRCA1 deficientes. Aunque todavía no se ha avanzado en estudios de validación que confirmen estos hallazgos, estas aproximaciones preliminares demuestran la capacidad de cribado de la plataforma desarrollada. En conjunto, esta tesis identifica a dCK como un nuevo y prometedor blanco terapéutico para los cánceres deficientes en BRCA2, sentando así las bases para futuras opciones terapéuticas que complementen a los inhibidores de PARP. Además, se concluyó el desarrollo de una nueva herramienta de cribado, la cual podrá ser utilizada para identificar nuevos compuestos con capacidad de inducción de LS que puedan usarse para el desarrollo de nuevos agentes terapéuticos para el tratamiento de cánceres BRCA-deficientes.
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| 650 |
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7 |
|a Bioquímica
|9 89
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| 650 |
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0 |
|a Genes BRCA1
|9 13439
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| 650 |
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0 |
|a Cribado
|9 9758
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| 650 |
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7 |
|a Cromosomas
|9 188
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| 650 |
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7 |
|a Carcinogenos
|9 1422
|
| 650 |
|
7 |
|a Genes
|9 346
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| 650 |
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7 |
|a Botanica
|9 93
|
| 650 |
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0 |
|a Núcleo celular
|9 9840
|
| 650 |
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7 |
|a Agentes antineoplásicos
|9 9
|
| 650 |
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7 |
|a Plantas medicinales
|9 561
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| 700 |
1 |
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|a Soria, Gastón
|c Universidad Nacional de Córdoba.
|c Facultad de Ciencias Químicas.
|c Departamento de Bioquímica Clínica.
|c Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas.
|c Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología.
|9 12241
|e ths
|
| 700 |
1 |
|
|a Smania, Andrea María
|c Universidad Nacional de Córdoba.
|c Facultad de Ciencias Químicas.
|c Departamento de Química Biológica.
|c Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas.
|c Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba.
|9 8456
|e cths
|
| 700 |
1 |
|
|a Panzetta de Dutari, Graciela María Del Valle
|c Universidad Nacional de Córdoba.
|c Facultad de Ciencias Químicas.
|c Departamento de Bioquímica Clínica.
|c Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas.
|c Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología.
|9 6380
|e cths
|
| 700 |
|
|
|a Prucca, César Germán
|c Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Química Biológica.Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba (CIQUIBIC).
|9 13437
|e cths
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| 700 |
|
|
|a Pontel, Lucas Blas
|c Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas.
|c Instituto de Investigación en Biomedicina de Buenos Aaires. Instituto Partner de la Sociedad Max Planck (IBIOBA - MPSP)
|9 13438
|e evl
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| 856 |
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|z Este documento se encuentra disponible en el Repositorio Digital de la Universidad Nacional de Córdoba, Argentina.
|z https://rdu.unc.edu.ar/
|z Embargo de visualización en RDU: Desde el 01 de diciembre de 2023 hasta el 30 de noviembre de 2025
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| 942 |
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|2 ddc
|c TESIS
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| 945 |
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|a jml
|f 19/12/2023
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| 952 |
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|1 0
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|7 0
|9 18171
|a FCQ
|b FCQ
|c TESIS
|d 2023-12-19
|e donación de la autora
|g 0.00
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|o R-T/616.994/G/14694
|p 14694
|r 2023-12-19
|w 2023-12-19
|y URL
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|c 9467
|d 9467
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