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| LEADER |
00000nam a2200000 4500 |
| 001 |
000670 |
| 003 |
AR-CdUAS |
| 005 |
20200709153019.0 |
| 008 |
080900s2007____ag_||||||m____||||||spa|d |
| 952 |
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|0 0
|1 0
|2 ddc
|4 0
|6 R_T574_19293U10555
|7 0
|9 9924
|a FCQ
|b FCQ
|c TESIS
|d 2007-07-27
|l 0
|o R-T/574.19293/U/10555
|p 10555
|r 2010-07-26
|w 2010-07-26
|y TESIS
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| 999 |
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|c 5881
|d 5881
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| 040 |
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|a AR-CdUAS
|c AR-CdUAS
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| 100 |
1 |
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|a Uliana, Andrea Soledad
|9 7905
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| 245 |
1 |
0 |
|a Determinantes moleculares de la concentración diferencial de las glicosiltransferasas de glicolípidos en subcompartimentos del complejo de Golgi /
|c Andrea Soledad Uliana.
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| 260 |
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|a [S.l. :
|b s.n.],
|c 2007
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| 300 |
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|a 64 p. :
|b il. col. ;
|c 30 cm.
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| 500 |
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|a Trabajo realizado en: CIQUIBIC - CONICET. Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba. Departamento de Química Biológica. Facultad de Ciencias Químicas. Universidad Nacional de Córdoba
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| 502 |
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|a Tesis (Dr. en Ciencias Químicas)--Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2007.
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| 511 |
0 |
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|a Director: Hugo J. F. Maccioni
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| 511 |
0 |
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|a Comisión de tesis: Cecilia Alvarez, Gustavo Chiabrando, Santiago Quiroga, Evaluador externo: Diego de Mendoza
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| 520 |
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|a La síntesis de glicolípidos complejos es catalizada por diferentes glicosiltransferasas residentes del complejo de Golgi. La mayoría de ellas son proteínas de membrana tipo II y están compuestas por un dominio COO-terminal luminal unido a un dominio NH2-terminal (Ntd) constituido por un tallo citoplasmático corto (CT) y una región transmembrana (TMR). Estas enzimas se organizan como complejos multienzimáticos y se concentran de manera selectiva en diferentes compartimentos sub-Golgi, superponiéndose y actuando sucesivamente en la adición de azúcares a glicolípidos aceptores. Los Ntds son capaces de localizar glicosiltransferasas en el complejo de Golgi, pero todavía no se conoce bien si además pueden conferirles concentración selectiva en diferentes compartimentos sub-Golgi. En este trabajo se estudió si los Ntds de Sia1T2, localizada en el Golgi proximal (cis, medio y trans), y de GaINAcT, que se concentra en trans GolgilTGN, concentran proteínas reporteras (YFP y CFP) en los compartimentos sub-Golgi correspondientes. La concentración sub-Golgi de los Ntds fusionados a variantes espectrales de GFP fue determinada en células CHO-K1 a partir de su comportamiento frente al agregado de brefeldina A (BFA). Microscopía de fluorescencia y fraccionamiento subcelular mostraron que el Ntd de SialT2 se concentra en un compartimento proximal del complejo de Golgi, y el de GalNAcT en elementos del TGN. El intercambio de TMR y CT entre SialT2 y GalNAcT indicó que la información para la concentración en Golgi distal o proximal está asociada a los CTs. Por otra parte, conociendo la existencia de un complejo formado por GaIT1, SialT1 y Sia1T2, se investigó si en células CHO-K1 que no expresan Sia1T2, la sublocalización de GalT1 y SialT1 era afectada cuando se coexpresaba Sia1T2. Experimentos previos del laboratorio habían mostrado que la síntesis de glicolípidos era afectada en forma diferente en células CHO-K1 silvestres (wt) y células CHO-K1 que expresan SialT2 (SiaIT2+). Se encontró que BFA y monensina impiden la síntesis de glicolípidos posteriores al gangliósido GM3 en células wt, pero en células Sia1T2+ esto ocurre más allá de GlcCer. Considerando la posibilidad de que la expresión de SialT2 estuviese modificando la localización sub-Golgi de GalT1 y SialT1 se determinó la localización sub-Golgi de las quimeras GaITh52-CFP y SiaIT11_54-YFP por microscopía de fluorescencia y por subfraccionamiento isopícnico. Mientras que BFA redistribuyó GaIT1-CFP y SiaIT1-YFP al RE en células wt, en células Sia1T2+ una fracción de estas quimeras permaneció asociada a compartimentos del Golgi distal, enriquecidos en marcadores de TGN y endosomas de reciclado. En células tratadas con BFA el porcentaje de GaIT1-CFP y SiaIT1-YFP asociadas a fracciones de membrana tipo Golgi separadas por subfraccionamiento isopícnico fue mayor en 5 Resumen células Sia1T2+ que en células wt. Estos efectos fueron revertidos anulando la expresión de SialT2 con siRNA específico. Los resultados indicaron que la localización sub-Golgi de complejos de glicosiltransferasas puede cambiar de acuerdo a los niveles relativos de expresión de las enzimas participantes y revelaron la capacidad de esta organela para adaptar la topología de la maquinaria de síntesis de glicolípidos a diferentes estados funcionales de la célula.
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| 590 |
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|a TESIS (DR. EN CIENCIAS QUIMICAS)--UNC--
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| 650 |
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4 |
|9 936
|a Glucolipidos
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| 650 |
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4 |
|9 939
|a Glicosiltransferasas
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| 650 |
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7 |
|a Proteínas
|9 595
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| 650 |
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4 |
|9 1341
|a Transporte biológico
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| 650 |
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4 |
|9 1884
|a Aparato de Golgi
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| 700 |
1 |
|
|a Maccioni, Hugo José Fernando
|e drt
|9 5559
|c Universidad Nacional de Córdoba.
|c Facultad de Ciencias Químicas.
|c Departamento de Química Biológica.
|c Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas.
|c Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba.
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| 700 |
1 |
|
|a Alvarez, Cecilia Inés
|e cths
|9 2028
|c Universidad Nacional de Córdoba.
|c Facultad de Ciencias Químicas.
|c Departamento de Bioquímica Clínica.
|c Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas.
|c Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología.
|
| 700 |
1 |
|
|a Chiabrando, Gustavo Alberto
|e cths
|9 3045
|c Universidad Nacional de Córdoba.
|c Facultad de Ciencias Químicas.
|c Departamento de Bioquímica Clínica.
|c Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas.
|c Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología.
|
| 700 |
1 |
|
|a Quiroga, Santiago
|e cths
|9 6706
|c Universidad Nacional de Córdoba.
|c Facultad de Ciencias Químicas.
|c Departamento de Química Biológica.
|c Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas.
|c Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba.
|
| 700 |
1 |
|
|a Mendoza, Diego De
|e evl
|9 12131
|
| 942 |
|
|
|c TESIS
|2 ddc
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| 945 |
|
|
|a jml
|f 09/07/20
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