Efectos de la aplicación de Radioaciones Laser Helio Neón de Baja Potencia en tumores malignos de glándulas submandibulares en ratas /

Las neoplasias de glándulas salivales causan destrucción glandular, y producen serios trastornos funcionales que afectan la calidad de vida del paciente. Normalmente existe un equilibrio entre la proliferación celular y la apoptosis, pero en el cáncer, aparecen mutaciones que dan lugar a la activación de genes estimulantes (oncogenes) o bien a la inactivación de genes supresores de la carcinogénesis. Esto provoca alteraciones en la regulación del ciclo celular y la apoptosis, produciéndose una proliferación desenfrenada celular y que, puestas de manifiesto inmunohistoquímicamente dan indicio de lo que está sucediendo con él. Los tratamientos de estos tumores son bastante restringidos (resección o radioterapia) y poseen un elevado índice de efectos secundarios. Estudios preliminares sobre el efecto de altas densidades de Radiaciones Laser de Baja Potencia sobre glándulas salivales informaron aumento de la apoptosis en ambos casos, lo que convertiría a estas radiaciones en un tratamiento alternativo. OBJETIVO: Estudiar el efecto que las RLBP, en densidades de energía altas, producen sobre tumores malignos inducidos con DMBA, en glándulas submandibulares de rata. MATERIALES Y MÉTODOS: Se utilizaron sesenta (60) ratas macho Wistar de ±120 g de peso corporal distribuídos en dos grupos de 30 animales: Grupo control (GC) y Grupo experimental (GE). Los animales de ambos grupos fueron anestesiados intraperitonealmente con una solución de Xilazina/ Ketamina, y se les expusieron las glándulas submandibulares. A ellas se les inyectó 50 μl de DMBA. Las ratas del GC se mantuvieron vivas durante 150 días post inyección; a las del GE se las mantuvo vivas durante 150 días post inyección y luego, se les aplicó laser de HE-Ne durante 6,5 minutos, sacrificándolas a las 12 horas post irradiación extirpándoseles las glándulas submandibulares. Treinta (30) derechas fueron fijadas en formol al 10% tamponado y procesadas según la técnica de rutina, obteniéndose cortes seriados teñidos con Hematoxilina-Eosina. Con ello se realizaron estudios histopatológicos, histomorfométricos y con microscopía electrónica de barrido, (FE-SEM). Veinticuatro (24) glándulas del lado izquierdo se procesaron inmunihistoquímicamente para p53, Bcl2 y Ki 67 y seis (6) con DAPI. RESULTADOS: Los tumores fueron en todos los casos carcinomas a células mioepiteliales. Histopatológicamente se detectó que en los casos experimentales se observaron aumento de las células tumorales apoptóticas en relación a los controles. Estos datos se corroboraron con el análisis estadístico histomorfométrico y de la coloración de Dapi que estableció diferencias estadísticamente significativas en ambos casos. El estudio con FE_SEM permitió confirmar que las figuras nucleares correspondientes a apoptósis eran las mismas que las observadas a microscopía óptica. Las marcaciones inmunohistoquímicas establecieron que p53 no se marcaba pero Bcl2 y Ki 67 se inmunomarcaron en mayor cantidad y estadísticamente significativas en los animales del GE. CONCLUSIÓN: Estos hallazgos nos permiten postular que el efecto de las RLBP sobre tumores de glándulas submandibulares de ratas, inducidos con DMBA, es el de modificar el ciclo celular de la célula tumoral aumentando el proceso apoptotico en ellas.
Salivary gland neoplasms cause glandular destruction producing serious functional impairments that affect the patient´s quality of life. Usually,there exist an equilibrium between cellular proliferation and apoptosis; despite that, where cancer is present,mutation can appear, giving place to the activation of genes stimulators (called oncogenes) or to the inactivation of carcinogenic gene suppressors. This phenomenon induces alterations in the cell cycle regulation and apoptosis, producing an unrestrained cellular proliferation, manifesting the issue through immunohistochemistry. Treatments for these tumors (resection or radiotherapy) are quite restricted and present a high rate of side effects. Preliminary studies about the effects of high densities doses of low-level laser therapy on salivary glands showed an apoptosis increase. So, RLBP could be a recommended.alternative therapy Objective: to study the effects of higher RLBP doses on malignant tumors induced with DMBA on the submandibular glands of rats. Materials and Methods: Sixty (60) male Wistar rats with a corporal weight of ±120 g were divided into two groups of thirty (30) a Control Group (CG) and an Experimental Group (EG). Each animals were intraperitoneally anesthetized with Xylazine/Ketamine to surgically expose the submandibular glands and injected with 50 uL of DMBA. The rats from the CG were kept alive for one hundred and fifty (150) days post injection and exposed to a HE-Ne laser pulse of 6. 5 minutes. The subjects were necropsied twelve (12) hours post radiation, proceeding and the submandibular glands were extracted. Thirty (30) were embedded in formaldehyde following routine procedures, procuring a series of tinted cuts with hematoxylin-eosin stains. The tissues were histopathology and histomorphometry studied and subjected to a field-emission scanning electron microscopy (FESEM). Twenty-four (24) glands from the left side were immunohistochemistry processed for p53, Bcl2, and Ki67. Six (6) with DAPI. Results: All the tumors, were myoepithelial carcinoma cells. In the experimental groups, by histopathology, an increase of tumorous apoptotic cells in relation to the control group were detected. These indications were corroborated with the statistics histomorphometric analysis and the DAPI fluorescence imaging that established significant statistical differences in both cases. The study with FE_SEM confirmed that the nuclear figures correspond to apoptotic cells, wich were the same observed by optical microscopy. The immunohistochemical markers established that p53 was not marked, but Bcl2 and Ki 67 were immunomarked in a higher quantity and statistically significant in animals from the EG group. Conclusion: the results of the current study allow us to claim that the effect of RLBP on submandibular glands of rats induced with DMBA is to modify the tumorous cell cycle by increasing the apoptotic cell process.

• Main Author: Zanotti, Alejandro Federico
• Other Authors: Plavnik, Luis Mario (Thesis advisor), Sotomayor, Claudia (co-Director)
• Format: Thesis Book
• Published: Córdoba : Facultad de Odontología. Universidad Nacional de Córdoba, 2019.
• Subjects: Rayos láser; Glándula submandibular; Neoplasias
• Online Access: Texto completo disponible en el Repositorio Digital de la U.N.C
• Physical Description: 73 p. ; il. col. , 29 cm.