| Summary: | La supervivencia de los embriones en desarrollo (emb.) depende del control y mantenimiento de su homeostasis. Modelos de estrés crónico por IMO durante la gestación pueden alterar diferentes factores y mecanismos que regulan el desarrollo normal. Bajo la hipótesis de que los estresores físicos tal como la inmovilización en planchas alteran la estructura, la función y la migración de las neuronas GnRH, y podría generar cambios morfológicos en el desarrollo del SNC, los objetivos consistieron en analizar si existen alteraciones en la migración, el número y las características morfológicas de las neuronas GnRH en embriones de ratas de 15, 17 y 19 días de edad gestacional, y posibles modificaciones de sus receptores estrogénicos (R-E); y determinar variaciones morfométricas durante la etapa de placoda olfatoria en relación al desarrollo del SNC. A tal fin, en condiciones de bioterio controladas, se estudiaron cortes seriados de cerebros embrionarios de 12, 15, 17 y 19 días, de madres controles (C) y estresadas (E) a quienes se les administró estrés crónico intermitente, homotípico, intenso, sin habituación. Se usaron técnicas de inmunomarcación y de análisis estereológico de imágenes sobre 3550 imágenes. Se realizó la valoración cualitativa y documentación microfotográfica. El análisis estadístico se realizó con ANOVA, prueba de Wilcoxon, y test "t" de Student. Los resultados muestran que las neuronas GnRH en 15 días de gestación se ubican fuera del encéfalo, predominantemente en el epitelio olfatorio, nervio terminal y nervio vómeronasal, donde se agruparon en racimos. Su inmunomarca fue leve y no presentaron axones diferenciados. Dentro del cerebro, en el área septal fueron escasas y con similar marca. En emb. C y E de 17 y 19 días las neuronas se desplazaron a las áreas cerebrales, y las encontradas en los nervios aumentaron su inmunomarca y sus axones. La neuronas presentes en áreas cerebrales rostrales mostraron intensa inmunomarca, mientras que en la banda diagonal y el área preóptica se hallan degranuladas. En emb. de 19 días el desplazamiento de las células se realizó hacia el área preóptica y la eminencia media, donde se encontraron gran cantidad de axones inmunomarcados, diferencia fundamental encontrada en los emb. E. En emb. C y E de 19 días se encontró un conjunto de neuronas GnRH mesencefálicas que corresponderían a la segunda forma de GnRH presente en los mamíferos. Nuestros estudios demostraron que la neuronas GnRH no poseen receptores estrogénicos clásicos, pero se determinó el hallazgo de neuronas marcadas positivamente en el área preóptica de emb. E que corresponden a neuronas intermediarias. Asimismo, en el análisis cuantitativo dentro de embriones C de 15 días, se comprobaron diferencias significativas en el número de neuronas entre las áreas predeterminadas 1 vs 2, y 2 vs 3 (p<0.01); y entre las áreas 3 vs 4, y 4 vs 5 (p<0.05). El análisis intragrupo de emb. E comprobó diferencias significativas en las áreas 1 vs 2, y 4 vs 5 (p<0.05); y entre áreas 2 vs 3, y 3 vs 4 (p<0.01). Entre emb. C vs E no hubo diferencias en todas las áreas. Dentro de embr. C de 17 días existieron diferencias significativas entre N2 vs N3, y N3 vs N4 (p<0.01), siendo no significativas entre N1 vs N2. Dentro de los embriones E se encontraron altas diferencias significativas entre todas las áreas (p<0.001). El análisis C vs E sólo detectó alta diferencia significativa en N2, mayor en E (p<0.01). Dentro de emb. C de 19 días, existió alta diferencia significativa entre N1 y N2 (p<0.001) y diferencia significativa para N2 vs N3 (p<0.05). En emb. E se comprobó diferencia significativa en N1 vs N2 (p<0.05) y alta diferencia significativa entre N3 Vs N4 (p<0.003), y sin diferencia entre N2 vs N3. El análisis C vs E reveló sólo diferencia significativa en área N3, mayor en emb. E. El análisis de las variables estereológicas medidas en 12 días (5 variables: 2 áreas, perímetro, espesor y densidad) y comparadas entre sí en emb. C vs E, demostró diferencias significativas sólo para el área y el espesor del prosencéfalo (p<0.05). Una segunda comparación realizada entre cada variable vs el área de la placoda olfatoria entre emb. C vs. E mostró diferencia significativa en todos los cocientes con excepción del área de placoda/densidad del prosencéfalo (p<0.01). Todos los resultados obtenidos fueron mayores en embriones E. En base a estos hallazgos se puede concluir que la morfología e inmunomarca de las neuronas GnRH es semejante entre embriones C y E. Dichas neuronas no poseen receptores estrogénicos con los anticuerpos empleados, considerándose a las neuronas R-E positivas como neuronas intersinápticas que estimulan o inhiben la secreción de GnRH. El proceso migratorio de las neuronas GnRH se cumple en los embriones de rata al igual que en todos los mamíferos, pero el estrés por IMO determinó una aceleración de dicho proceso. El mayor crecimiento de la vesícula prosencefálica en embriones estresados podría deberse al aumento de factores tróficos o a la variación del proceso de apoptosis reconocido como determinante en la formación del SNC
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