Desarrollo de una herramienta nanotecnológica en cultivos neuronales que permita aislar el comportamiento axonal del somático para realizar tratamientos diferentes.

Las neuronas del Ganglio de la Raíz Dorsal (DRG) son células altamente polarizadas y constituyen la base del flujo de información del Sistema Nervioso Periférico Aferente. Las mismas poseen dos dominios celulares claramente diferenciados morfológica y funcionalmente: el somático y el axonal. En el c...

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Bibliographic Details
Main Author: Jalil, Sami
Other Authors: Grasselli, Mariano (Co-Dir.)
Format: Thesis Book
Language:English
Published: Córdoba: [s./n.], 2017
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Description
Summary:Las neuronas del Ganglio de la Raíz Dorsal (DRG) son células altamente polarizadas y constituyen la base del flujo de información del Sistema Nervioso Periférico Aferente. Las mismas poseen dos dominios celulares claramente diferenciados morfológica y funcionalmente: el somático y el axonal. En el cuerpo humano, estos dos dominios se encuentran en microentornos que difieren significativamente el uno del otro. Para poder estudiar neuronas en cultivo in vitro de forma tal que recree la heterogeneidad del microentorno in vivo, ideamos una estrategia de cultivo en dos compartimentos separados para evitar la difusión de moléculas entre el compartimento superior (donde se encuentran los cuerpos neuronales) y el compartimento inferior (donde solo crecen axones). Los mismos se encuentran separados por una membrana con poros perfectos (track-etched) de 1 I.Im de diámetro. La estrategia se basa en el bloqueo de los poros luego del crecimiento axonal, empleando Micropartículas poliméncas (MPs) diseñadas adhoc que interaccionan con dichos poros de forma electroestática y lo taponan. En el presente trabajo, hemos determinado que la mejor combinación para lograr un bloqueo significativo se obtiene usando MPs de 800 nm y sulfonadas (carga negativa) en membranas track-etched tratadas con Polietilenimina (carga positiva).También hemos podido comprobar que se produce un bloqueo significativo de la difusión de anticuerpos durante 24h en condiciones de cultivo. Así mismo hemos descartado la toxicidad de las MPs tanto en cultivos de líneas celulares (HEK293T) como en cultivos primarios neuronales, Por último, utilizamos esta nueva estrategia para realizar una privación local de factor trófico (NGF) en neuronas sensoriales demostrando la funcionalidad de la herramienta desarrollada.
Physical Description:42 h.; fots,; grafs.; tabls.; ils.