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La senescencia celular es actualmente considerada una respuesta al estrés y está caracterizada por un arresto estable del ciclo celular acompañado de aumentos en la expresión de diferentes citoquinas, entre ellas interleuquina 6 (IL-6), la cual es necesaria para la inducción y mantenimiento de este...
La senescencia celular es actualmente considerada una respuesta al estrés y está caracterizada por un arresto estable del ciclo celular acompañado de aumentos en la expresión de diferentes citoquinas, entre ellas interleuquina 6 (IL-6), la cual es necesaria para la inducción y mantenimiento de este proceso. En el presente trabajo de Tesina se propuso evaluar, in vitro, los efectos de IL-6 exógena y endógena sobre la proliferación y senescencia de células hipofisarias normales y tumorales. Para este fin se realizaron cultivos primarios adenohipofisarios de ratas macho Wistar adultas a las que se indujo el desarrollo tumoral mediante la implantación subcutánea de capsulas de silástico conteniendo benzoato de estradiol (lOmg) durante 40 días (E40). Animales controles fueron ¡mplantados con capsulas vacías (n=8/cultivo). Al quinto día de cultivo, las células fueron expuestas a IL-6 exógena (1- lOng/mI; 24h) en tanto que los efectos de IL-6 endógena fueron evaluados mediante el desafío con lipopolisacárido bacteriano (LPS; 0,1-2pgIml; 24h). Además, las células fueron incubadas con Brefeldin-A, bloqueante de la secreción (BFA; 0,lpgJml; 2h) o con BAY, inhibidor de la translocación nuclear de NF-KB (lpgIml, 24h) solos o combinados con LPS. Con posterioridad a los tratamientos se evaluó: la actividad de í3- galactosidasa asocada a senescencia (SA-3-gal) por ensayos citoquímicos; la proliferación celular mediante la inmunodetección de Ki67; la expresión de IL-6 por inmunofluorescencia (lF); secreción esta citoquina mediante ELISA y la expresión del factor de transcripción NF-KB por western blot. Para el análisis estadístico de los datos, se empleó MLGM y Test de Fisher (p<0,O5). En hipófisis normales, IL-6 exógena disminuyó tanto el número de células senescentes como proliferantes. Sin embargo, en E40, IL-6 incrementó el porcentaje de células SA-3-gal positivas acompañado por una disminución en la proliferación celular. El desafío con LPS indujo la translocación nuclear de NF-KB, estimuló la secreción de lL-6 y aumentó el número de células senescentes normales y tumorales, mientras que sólo promovió la proliferación celular en contextos tumorales. En cultivos tratados BFA+LPS, el bloqueo de la secreción de lL-6 inhibió la capacidad de LPS de aumentar el número de células senescentes, exponiendo que la inducción de senescencia requiere de la secreción de factores al medio. La inhibición de la translocación de NF-KB mediante BAY reveló que este factor es un importante regulador del balance en las respuestas senescente y proliferativa. Los resultados obtenidos permiten evidenciar la contribución de IL-6 en la regulación de la proliferación y senescencia hipofisarias en contextos normales y tumorales, con la participación de NF-KB como modulador de las respuestas al estrés celular. Dada la gran relevancia funcional de esta glándula endocrina en el organismo, la emergencia de la senescencia celular constituye, indudablemente, una de las variadas respuestas tisulares de la hipófisis frente a lesiones proliferativas y su rol adquiere relevancia en la fisiopatogenia del tumor hipofisario a fin de regular su crecimiento descontrolado.
