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Rol de Tctex-1 en la generación y/o transporte de Golgi outpost en dendritas de neuronas maduras
Las neuronas son un ejemplo clásico de células altamente polarizadas, presentando como característica un solo axón largo y numerosas dendritas cortas y ramificadas. Axón y dendritas difieren en la organización de los componentes del citoesqueleto, como así también en la composición y posicionamiento...
Las neuronas son un ejemplo clásico de células altamente polarizadas, presentando como característica un solo axón largo y numerosas dendritas cortas y ramificadas. Axón y dendritas difieren en la organización de los componentes del citoesqueleto, como así también en la composición y posicionamiento de organelas. Por ejemplo, las dendritas poseen Golgi outpost GOPs) los cuales están ausentes en el axón. Estas organelas funcionan como sucursales del aparato de Golgi (AG) y son necesarios para el correcto desarrollo del árbol dendrítico. Actualmente, mediante estudios realizados en Drosophila se sugiere a la proteína motora dineína corno el motor que media el transporte de GOPs en neuronas. Tctex-l, una cadena liviana de dineína está involucrada en el desarrollo axonal y juega un papel importante en el desarrollo dendrítico. Esta proteína es utilizada como adaptador en el transporte de rodopsina y en experimentos previos de nuestro laboratorio, se observó que al sobre-expresarla aumenta el número de GOPs. Con estos resultados, propusimos a Tctex-1 como adaptador GOPs-dineína. Por otro lado, existe una población de Tctex-1 que se encuentra libre de dineína llamada Tctex-1 citosólico que no posee función motora. En este trabajo se propuso analizar si el aumento en el número de GOPs que se observa en neuronas que sobre-expresan Tctex-1 es debido a una demanda de la vía secretoria por la presencia de Tctex- 1 citosólico y el efecto neuritogénico que éste tiene en neuronas, o se debe a su actividad motora como adaptador GOPs-dineína. Para esto se utilizaron dos mutantes de Tctex-1, T94A y T94E, que se encuentran unido a dineína y en forma citosólica, respectivamente : se analizó la dinámica y el número de GOPs en cultivos de neuronas de rata. Al sobre-expresar T94A no se encontraron diferencias respecto del control mientras que el sobre-expresar T94E el mero de GOPs aumentó significativamente. Estos resultados nos permiten sugerir que Tctex-1 no estaría actuando como adaptador GOPs-dineìna y que el incremento de GOPs observado inicialmente, sería en respuesta a una demanda de membrana por el efecto neuritogénico de esta proteina. Con este trabajo se avanza en el conocimiento del mecanismo de transporte y ±—ración de GOPs y deja abierta una puerta para futuras investigaciones en busca de otra cadena de dineína o proteìna adaptadora que cumpla la función de adaptador cargo-dineína.