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Análisis de implicancia de flavodoxina en la resistencia al estrés oxidativo en el patógeno oportunista Pseudomonas aeruginosa
Resumen El estrés oxidativo genera graves lesiones en las células mediante la oxidación de sus macromoléculas. Pero los organismos vivientes han desarrollado mecanismos que le permiten evitar o amortiguar dichos daños. Entre ellos, se encuentran sistemas de defensa que evitan la generación y propaga...
|a Análisis de implicancia de flavodoxina en la resistencia al estrés oxidativo en el patógeno oportunista
|b Pseudomonas aeruginosa
260
|a Córdoba:
|b [s./n.],
|c 2011
300
|a 53 h.
|b grafs, col.; tbls. col.
502
|a Tesina (Grado en Ciencias Biológicas)--Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencia Exactas, Físicas y Naturales.- Centro de Investigaciones en Química Biológica (CIQUIBIC-CONICET). Facultad de Ciencias Químicas. U.N.C. - 2011
520
|a Resumen El estrés oxidativo genera graves lesiones en las células mediante la oxidación de sus macromoléculas. Pero los organismos vivientes han desarrollado mecanismos que le permiten evitar o amortiguar dichos daños. Entre ellos, se encuentran sistemas de defensa que evitan la generación y propagación de especies reactivas del oxígeno (ROS), como la protema transportadora de electrones flavodoxina (Fld) que participa en reacciones oxido-reducción regulando el balance NADP+/NADPH y previniendo en consecuencia la producción de ROS. Los mecanismos de resistencia al estrés oxidativo son de particular importancia para los patógenos bacterianos, quienes deben hacer frente al ambiente desfavorable que les impone el organismo hospedador. Tal es el caso de Pseudomonas aeruginosa, especie que presenta la particularidad de ser un patógeno oportunista de plantas, animales, y humanos en donde es causante de infecciones pulmonares crónicas de pacientes con fibrosis quística, constituyendo su principal causa de morbilidad y mortalidad. Debido a que al presente no se tiene ninguna información sobre Flds o proteínas equivalentes en P. aeruginosa, el objetivo del presente trabajo fue la de investigar si, al igual que en otras especies bacterianas, Fld pueda formar parte de una respuesta al estrés oxidativo. Asimismo, dado que la prevención de formación de ROS es importante para evitar/disminuir sus efectos mutagénicos, en este trabajo se estudió si la expresión de este tipo de transportadores podría estar implicado en mecanismos de compensación del fenotipo hipermutador producido por deficiencia en el sistema GO. Para ello, el gen de la Fld de la cianobacteria Anabaena PC7119 (fldAn) fue clonado en vectores adecuados y expresado en cepas hipermutadoras mulantes mutTáe P. aeruginosa, observándose que el mismo confiere protección al tratamiento con H202 así como una complementación parcial de la hipermutabilidad característica de estas cepas. Seguidamente, se determinó que P. aeruginosa posee una secuencia génica que dada la alta homología a nivel de estructura secundaria con FldAn de Anabaena y Fld I de E. coli, codificaría para una flavodoxina propia de P. aeruginosa (FldPa). Notablemente, se observó que una mutante de P. aeruginosa deficiente en el gen fldPa posee una sensibilidad significativamente incrementada al tratamiento con H2O2, sensibilidad que es completamente rescatada mediante la expresión heteróloga de fldAn de Anabaena. Finalmente, se determinó que la sobreexpresión defldPa en una cepa de P. aeruginosa hipermutadora muT, conferiría protección parcial contra la toxicidad y mutagenicidad producida por el H2O2- En su conjunto, los resultados obtenidos en este trabajo permiten concluir que en P. aeruginosa las FIds jugarían un rol importante en mecanismos de resistencia al estrés oxidativo, constituyendo asimismo factores antimutadores al evitar la formación de ROS y proteger a las células de su potencial actividad mutagénica.
